TÓM TẮT VÀ GIẢI THÍCH BÀI KIỂM TRA
Chikungunya là một bệnh nhiễm virus hiếm gặp lây truyền qua vết cắn của muỗi Aedes aegypti bị nhiễm bệnh.Nó được đặc trưng bởi phát ban, sốt và đau khớp nghiêm trọng (đau khớp) thường kéo dài từ ba đến bảy ngày.Tên này bắt nguồn từ từ Makonde có nghĩa là "cái uốn cong" liên quan đến tư thế khom lưng phát triển do các triệu chứng viêm khớp của bệnh.Xảy ra vào mùa mưa
ở các khu vực nhiệt đới trên thế giới, chủ yếu ở Châu Phi, Đông Nam Á, miền nam Ấn Độ và Pakistan.Các triệu chứng thường không thể phân biệt được về mặt lâm sàng như những triệu chứng gặp ở bệnh sốt xuất huyết.Thật vậy, nhiễm trùng kép sốt xuất huyết và chikungunya đã được báo cáo ở Ấn Độ.Không giống như sốt xuất huyết, các biểu hiện xuất huyết tương đối hiếm và thường bệnh này là bệnh sốt tự giới hạn.Vì thế nó rất quan trọng
để phân biệt lâm sàng sốt xuất huyết với nhiễm CHIK.CHIK được chẩn đoán dựa trên phân tích huyết thanh học và phân lập virus ở chuột hoặc nuôi cấy mô.Xét nghiệm miễn dịch IgM là phương pháp xét nghiệm thực tế nhất trong phòng thí nghiệm.Xét nghiệm nhanh Chikungunya IgG/IgM sử dụng các kháng nguyên tái tổ hợp có nguồn gốc từ protein cấu trúc của nó, nó phát hiện kháng thể IgG/IgM anti-CHIK trong huyết thanh hoặc huyết tương của bệnh nhân trong vòng 20 phút.Việc kiểm tra có thể được thực hiện bởi người chưa được đào tạo hoặc
nhân viên có trình độ tối thiểu, không có thiết bị phòng thí nghiệm cồng kềnh.
NGUYÊN TẮC
Xét nghiệm nhanh kháng nguyên Chikungunya IgG/IgM+NS1 là xét nghiệm miễn dịch sắc ký dòng chảy bên.Băng thử nghiệm bao gồm dải IgG/IgM và dải NS1.
Dải IgG/IgM:1) miếng liên hợp màu đỏ tía chứa kháng nguyên vỏ tái tổ hợp Chikungunya kết hợp với vàng keo (liên hợp sốt xuất huyết) và liên hợp vàng IgG của thỏ, 2) dải màng nitrocellulose chứa hai dải thử (dải G và M) và một dải dải điều khiển (băng C).Dải G được phủ sẵn kháng thể để phát hiện vi rút IgG kháng Chikungunya, dải M được phủ kháng thể để phát hiện vi rút IgM chống Chikungunya và dải C được phủ trước bằng IgG kháng thỏ của dê.
Dải NS1:1) miếng liên hợp màu đỏ tía chứa kháng nguyên kháng Chikungunya NS1 của chuột kết hợp với vàng keo (liên hợp Chikungunya Ab), 2) dải màng nitrocellulose chứa dải thử (dải T) và dải kiểm soát (dải C).Dải T được phủ trước bằng kháng nguyên kháng Chikungunya NS1 của thỏ và dải C được phủ trước bằng kháng thể IgG chống chuột.
Dải IgG/IgM: Khi một lượng mẫu thử vừa đủ được phân phối vào giếng mẫu của băng thử, mẫu sẽ di chuyển nhờ tác động mao dẫn trên băng.Virus IgG kháng Chikungunya nếu có trong mẫu vật sẽ liên kết với các liên hợp Chikungunya.Sau đó, phức hợp miễn dịch được thu giữ bởi thuốc thử được phủ trên dải G, tạo thành dải G màu đỏ tía, cho thấy kết quả xét nghiệm IgG dương tính với virus Chikungunya và gợi ý nhiễm trùng gần đây hoặc tái nhiễm.Vi rút IgM kháng Chikungunya, nếu có trong mẫu vật, sẽ liên kết với các liên hợp Chikungunya.Sau đó, phức hợp miễn dịch được thu giữ bởi thuốc thử được phủ sẵn trên dải M, tạo thành dải M màu đỏ tía, cho thấy kết quả xét nghiệm IgM dương tính với virus Chikungunya và gợi ý một ca nhiễm trùng mới.Sự vắng mặt của bất kỳ dải thử nghiệm nào (G và M) cho thấy kết quả âm tính. Xét nghiệm chứa chất kiểm soát nội bộ (dải C) sẽ biểu hiện dải màu đỏ tía của phức hợp miễn dịch IgG/ kháng thỏ của dê.
liên hợp vàng IgG của thỏ bất kể sự phát triển màu sắc trên bất kỳ dải T nào.Nếu không, kết quả xét nghiệm không hợp lệ và mẫu phải được kiểm tra lại bằng thiết bị khác.
Dải NS1: Khi một lượng mẫu thử vừa đủ được phân phối vào giếng mẫu của băng cassette, mẫu sẽ di chuyển bằng tác động mao dẫn trên băng thử.Chikungunya NS1 Ag nếu có trong mẫu vật sẽ liên kết với liên hợp Chikungunya Ab.Sau đó, phức hợp miễn dịch được kháng thể kháng NS1 đã được tiền chế của thỏ bắt giữ trên màng, tạo thành dải T màu đỏ tía, cho thấy kết quả xét nghiệm Chikungunya Ag dương tính.Sự vắng mặt của dải T cho thấy kết quả âm tính.Xét nghiệm chứa chất đối chứng nội (dải C) sẽ biểu hiện dải màu đỏ tía của phức hợp miễn dịch liên hợp IgG/vàng IgG kháng chuột của dê bất kể sự hiện diện của dải T màu.Nếu không, kết quả xét nghiệm không hợp lệ và mẫu phải được kiểm tra lại bằng thiết bị khác.
