TÓM TẮT VÀ GIẢI THÍCH BÀI KIỂM TRA
Vi-rút sốt xuất huyết, một họ gồm bốn loại vi-rút huyết thanh riêng biệt (Den 1,2,3,4), là những vi-rút RNA cảm ứng dương tính, có vỏ bọc đơn lẻ.Vi-rút được truyền bởi muỗi thuộc họ Stegemyia đốt ban ngày, chủ yếu là Aedes aegypti và Aedes albopictus.Ngày nay, hơn 2,5 tỷ người sống ở các khu vực nhiệt đới châu Á, châu Phi, châu Úc và châu Mỹ có nguy cơ nhiễm sốt xuất huyết.Ước tính có khoảng 100 triệu trường hợp sốt xuất huyết và 250.000 trường hợp sốt xuất huyết Dengue đe dọa tính mạng xảy ra hàng năm trên toàn thế giới1-3.
Phát hiện kháng thể IgM trong huyết thanh học là phương pháp phổ biến nhất để chẩn đoán nhiễm virus sốt xuất huyết.Gần đây, việc phát hiện các kháng nguyên được giải phóng trong quá trình nhân lên của virus ở bệnh nhân bị nhiễm bệnh cho thấy kết quả rất khả quan.Nó cho phép chẩn đoán từ ngày đầu tiên sau khi bắt đầu sốt cho đến ngày thứ 9, khi giai đoạn lâm sàng của bệnh kết thúc, do đó cho phép điều trị sớm ngay lập tức4-. Xét nghiệm nhanh Dengue IgG/IgM được phát triển để phát hiện kháng nguyên sốt xuất huyết lưu hành trong huyết thanh, huyết tương hoặc máu toàn phần.Thử nghiệm có thể được thực hiện bởi nhân viên chưa được đào tạo hoặc có kỹ năng tối thiểu, không có thiết bị phòng thí nghiệm.
NGUYÊN TẮC
Xét nghiệm nhanh Dengue IgG/IgM là xét nghiệm miễn dịch sắc ký dòng chảy bên.Băng thử nghiệm bao gồm: 1) một miếng liên hợp màu đỏ tía chứa các kháng nguyên vỏ tái tổ hợp sốt xuất huyết được kết hợp với keo vàng (liên hợp sốt xuất huyết) và liên hợp vàng IgG của thỏ, 2) một dải màng nitrocellulose chứa hai dải thử nghiệm (dải G và M) và một dải đối chứng (dải C).Dải G được phủ sẵn kháng thể để phát hiện vi rút kháng sốt xuất huyết IgG, dải M được phủ kháng thể để phát hiện vi rút kháng sốt xuất huyết IgM và dải C được phủ trước IgG kháng thỏ của dê.
Khi một lượng mẫu thử đủ lớn được phân phối vào giếng mẫu của băng thử nghiệm, mẫu sẽ di chuyển bằng tác động mao dẫn qua băng.IgG kháng virus Dengue nếu có trong bệnh phẩm sẽ liên kết với thể tiếp hợp Dengue.Phức hợp miễn dịch sau đó được thuốc thử phủ trên dải G bắt giữ, tạo thành dải G có màu đỏ tía, cho biết kết quả xét nghiệm IgG dương tính với vi rút sốt xuất huyết và gợi ý nhiễm trùng gần đây hoặc lặp lại.IgM kháng virus Dengue nếu có trong mẫu bệnh phẩm sẽ liên kết với thể tiếp hợp Dengue.Phức hợp miễn dịch sau đó được thu giữ bởi thuốc thử được phủ sẵn trên dải M, tạo thành dải M có màu đỏ tía, cho thấy kết quả xét nghiệm IgM dương tính với vi rút sốt xuất huyết và gợi ý một bệnh nhiễm trùng mới.
Việc không có bất kỳ dải thử nghiệm nào (G và M) cho thấy kết quả âm tính. Thử nghiệm chứa chất kiểm soát nội bộ (dải C) sẽ biểu hiện dải màu đỏ tía của phức hợp miễn dịch IgG dê/IgG thỏ kháng thỏ bất kể sự phát triển màu sắc trên bất kỳ dải T nào.Nếu không, kết quả xét nghiệm không hợp lệ và mẫu xét nghiệm phải được xét nghiệm lại bằng thiết bị khác.