Bộ xét nghiệm nhanh Leishmania IgG/IgM (Vàng keo)

Bệnh leishmania nội tạng, hay Kala-azar, là một bệnh nhiễm trùng lan rộng do một số phân loài của L. donovani gây ra.Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) ước tính căn bệnh này sẽ ảnh hưởng đến khoảng 12 triệu người ở 88 quốc gia.Nó được truyền sang người qua vết cắn của loài ruồi cát Phlebotomus, chúng bị nhiễm trùng do ăn động vật bị nhiễm bệnh.Mặc dù đây là một căn bệnh được tìm thấy ở các nước nghèo nhưng ở Nam Âu, nó đã trở thành bệnh nhiễm trùng cơ hội hàng đầu ở bệnh nhân AIDS.Việc xác định sinh vật L. donovani từ máu, tủy xương, gan, hạch bạch huyết hoặc lá lách mang lại phương tiện chẩn đoán rõ ràng.Phát hiện huyết thanh kháng thể L.donovani IgM được coi là dấu hiệu tuyệt vời cho bệnh leishmania nội tạng cấp tính.Các xét nghiệm được sử dụng tại phòng khám bao gồm ELISA, kháng thể huỳnh quang hoặc xét nghiệm ngưng kết trực tiếp 4-5.Gần đây, việc sử dụng protein đặc hiệu của L. donovani trong thử nghiệm đã cải thiện đáng kể độ nhạy và độ đặc hiệu.

Xét nghiệm nhanh kết hợp Leishmania IgG/IgM là xét nghiệm huyết thanh dựa trên protein tái tổ hợp, phát hiện đồng thời kháng thể IgG và IgM đối với L. Donovani.Bài kiểm tra cung cấp kết quả đáng tin cậy trong vòng 15 phút mà không cần bất kỳ dụng cụ nào.

Xét nghiệm nhanh Leishmania IgG/IgM là xét nghiệm miễn dịch sắc ký dòng chảy bên.Hộp thử nghiệm bao gồm: 1) một miếng liên hợp màu đỏ tía chứa kháng nguyên L. donovani tái tổ hợp được kết hợp với vàng keo (liên hợp Leishmania) và liên hợp vàng IgG của thỏ, 2) dải màng nitrocellulose chứa hai dải thử nghiệm (dải T1 và T2) và một dải điều khiển (băng C).Dải T1 được phủ sẵn IgM kháng người đơn dòng để phát hiện kháng thể L.donovani IgM, dải T2 được phủ trước bằng thuốc thử để phát hiện kháng thể L.donovani IgG, và dải C được phủ trước bằng IgG kháng dê của dê.

Khi một lượng mẫu thử vừa đủ được phân phối vào giếng mẫu của băng cassette, mẫu sẽ di chuyển nhờ tác động mao dẫn trên băng cassette.L. donovani IgM nếu có trong mẫu xét nghiệm sẽ liên kết với liên hợp Leishmania.Sau đó, phức hợp miễn dịch được kháng thể IgM kháng người được phủ sẵn trên màng bắt giữ, tạo thành dải T1 màu đỏ tía, cho thấy kết quả xét nghiệm L. donovani IgM dương tính.L. donovani IgG nếu có trong mẫu vật sẽ liên kết với các liên hợp Leishmania.Sau đó, phức hợp miễn dịch được thu giữ bởi các thuốc thử được phủ sẵn trên màng, tạo thành dải T2 màu đỏ tía, cho thấy kết quả xét nghiệm L. donovani IgG dương tính.

Sự vắng mặt của bất kỳ dải T nào (T1 và T2) cho thấy kết quả âm tính.Xét nghiệm chứa chất đối chứng nội (dải C) sẽ biểu hiện dải màu đỏ tía của phức hợp miễn dịch của liên hợp IgG-vàng IgG/thỏ kháng thỏ của dê bất kể sự phát triển màu sắc trên bất kỳ dải T nào.Nếu không, kết quả xét nghiệm không hợp lệ và mẫu phải được kiểm tra lại bằng thiết bị khác.