TÓM TẮT VÀ GIẢI THÍCH BÀI KIỂM TRA
Sốt rét là một bệnh sốt, tan máu, do muỗi truyền, lây nhiễm cho hơn 200 triệu người và giết chết hơn 1 triệu người mỗi năm.Nó được gây ra bởi bốn loài Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale và P. malariae.Tất cả các plasmodia này lây nhiễm và phá hủy hồng cầu của con người, tạo ra ớn lạnh, sốt, thiếu máu và lách to.P. falciparum gây bệnh nghiêm trọng hơn các loài ký sinh trùng khác và gây ra hầu hết các trường hợp tử vong do sốt rét, và đây là một trong hai mầm bệnh sốt rét phổ biến nhất.
Theo truyền thống, bệnh sốt rét được chẩn đoán bằng cách chứng minh các sinh vật trên vết máu ngoại vi dày được nhuộm Giemsa và các loài plasmodium khác nhau được phân biệt bằng sự xuất hiện của chúng trong hồng cầu bị nhiễm bệnh.Kỹ thuật này có khả năng chẩn đoán chính xác và đáng tin cậy, nhưng chỉ khi được thực hiện bởi các nhà kính hiển vi lành nghề sử dụng các giao thức xác định, điều này gây ra những trở ngại lớn cho các khu vực xa xôi và nghèo khó trên thế giới.
Thử nghiệm nhanh Pf Ag được phát triển để giải quyết những trở ngại này.Nó phát hiện kháng nguyên đặc hiệu Pf pHRP-II trong mẫu máu người.Nó có thể được thực hiện bởi nhân viên chưa được đào tạo hoặc có kỹ năng tối thiểu, không có thiết bị phòng thí nghiệm.
NGUYÊN TẮC
Xét nghiệm nhanh Pf Ag là xét nghiệm miễn dịch sắc ký dòng chảy bên.Các thành phần của que thử bao gồm: 1) một miếng liên hợp màu đỏ tía chứa kháng thể đơn dòng kháng pHRP-II được kết hợp với vàng dạng keo (liên hợp vàng pHRP II), 2) một dải màng nitrocellulose chứa một dải thử nghiệm (Pf) và một dải đối chứng (dải C).Dải Pf được phủ trước bằng kháng thể đa dòng kháng pHRP-II và dải C được phủ trước bằng IgG kháng chuột của dê.
Trong quá trình xét nghiệm, một lượng mẫu máu thích hợp được phân phối vào giếng mẫu (S) của băng xét nghiệm, dung dịch đệm ly giải được thêm vào giếng đệm (B).Dung dịch đệm chứa chất tẩy rửa làm ly giải các tế bào hồng cầu và giải phóng kháng nguyên pHRPII, kháng nguyên này di chuyển nhờ hoạt động mao dẫn qua dải được giữ trong băng cassette.pHRP-II nếu có trong mẫu vật sẽ liên kết với liên hợp pHRP II-vàng.Phức hợp miễn dịch sau đó được bắt giữ trên màng bởi các kháng thể đa dòng antipHRP II được phủ sẵn, tạo thành một dải Pf có màu đỏ tía, cho thấy kết quả xét nghiệm dương tính với Pf.
Sự vắng mặt của dải Pf cho thấy kết quả âm tính.Xét nghiệm chứa chất đối chứng nội bộ (dải C) sẽ biểu hiện dải màu đỏ tía của phức hợp miễn dịch IgG kháng chuột của dê/IgG chuột (dải liên hợp vàng pHRP II) bất kể sự phát triển màu sắc trên bất kỳ dải Pf nào.Nếu không, kết quả xét nghiệm không hợp lệ và mẫu xét nghiệm phải được xét nghiệm lại bằng thiết bị khác.
